红腰鼓剧情讲述了足智多谋的女民兵吴翠萍，成长为一个合格的八路军战士的故事。
1940年，山西问水村民兵队队长窦三喜召集邻村的民兵骨干开会，商讨如何端掉伪军据点薛山寨事宜，但因奸细出卖，所有人壮烈牺牲，缺席会议的妇救会主任翠萍被人怀疑是奸细，为了证明自己的清白，翠萍利用自己的智慧联合了抗日义军首领岳五木拿下了据点，并在八路军连长罗青山的帮助下，不仅证明了自己的清白，还挖出了奸细。
随后，罗青山带领翠萍等人重建队伍，发动民众填死水井、炸毁碾磨，巧夺战略物资，配合大部队对铁路线路轨、车站等进行破坏活动，与日军指挥官上衫勇频频对抗，气急败坏的上衫勇发动大规模围剿计划，身边战友们一个个牺牲，翠萍也从一个当初妇救会干事成长为一名合格的八路军战士，最终粉碎了上衫勇一系列的围剿计划，策应大部队反围剿运动。一个月后，翠萍奔赴天津，她带着战友的遗志和爱，投入到了新的战斗任务中。
